Metoder
En begrænsning ved retrovirus
Den retrovirale livscyklus gør at genomet kun kan integreres i target cellen hvis tagret cellen deler sig, dvs. de skal være prolifererende; dvs. man kan f.eks. ikke bruge modne fedtceller, for de deler sig ikke. Så kan man i stedet bruge lentivirus.
IP = immunopræcipiteret, som er
Der er der immuno-udfældet med DNA
Input fraktion
Hele celle lysat hvor der ikke er lavet pull-down
IN = input, som er
Hele celle lysatet man startede med
Hvad betyder det at 'transducere' i en laboratorie teknik?
Virus-medieret gen(plasmid)-overførsel til mammale celler
Hvad betyder det at 'transfektere' i en laboratorie teknik?
At et lille molekyle (DNA, RNA eller antistof) overføres til mammale celler
Hvad betyder det at 'transformere' i en laboratorie teknik?
At et plasmid indsættes i en bakterie
Hvilke to kategorier af retrovirus findes der?
Ecotrop og amfotrop
IgG kontrol
En kontrol, der viser at vores antistoffer er specifikke. Tester om antistoffets uspecifikke del binder stoffet man undersøger, eller om det er den specifikke del, som vi håber på. Hvis IgG kontrollen ikke binder, må det være specifikt for vores antistof.
Hvilke vigtige kontroller bør man have til hhv. co-immunpræcipitering og immunopræcipitering?
IgG antistof kontrol og en tom vektor
Hvilke tre typer virus findes der?
Retrovirus, lentivirus og adenovirus