Medidas para trabajar con seguridad en el laboratorio y determinación de pH y soluciones amortiguadoras
BSL-3
-Agentes: Agentes autóctonos o exóticos con potencial de transmisión por aerosol, enfermedad que puede derivar en consecuencias graves o letales -.Prácticas (además de BSL-2): Acceso controlado, descontaminación de todos los desechos, descontaminación de la ropa del laboratorio antes del lavado, suero de línea de base -Barreras primarias: Cabinas de seguridad Clase I o II u otros dispositivos de contención física utilizados para todas las manipulaciones abiertas; personal expuesto: guantes; protección respiratoria necesaria. -Barreras secundarias (Además de BSL-II): Separación física de los corredores de acceso, acceso de cierre automático con doble puerta, no se recircula el aire de escape, flujo de aire negativo dentro del laboratorio
BSL-2
-Agentes: Asociados con la enfermedad humana, riesgo= daño percutáneo, ingestión, exposición de la membrana mucosa -Prácticas (Además de las BSL-1): Acceso restringido, señales de advertencia de riesgo biológico, precauciones para "objetos punzocortantes", manual de bioseguridad que define la descontaminación necesaria de desechos o las políticas de control médico. -Barreras primarias: Cabinas de Bioseguridad Clase I o II u otros dispositivos de contención física utilizados para todas las manipulaciones de agentes que provocan salpicaduras o aerosoles de materiales infecciosos. Personal expuesto: guantes, protección del rostro cuando es necesaria. -Barreras secundarias: BSL-1 más autoclave disponible.
Nivel de Bioseguridad (BSL) 1
-Agentes: No se ha comprobado que producen enfermedad en adultos sanos -Prácticas: Prácticas microbiológicas estándar -Equipos de Bioseguridad (Barreras primarias): No se exige ninguno -Instalaciones (Barreras secundarias): Se exige mesa abierta con pileta(s) en el laboratorio.
BSL-4
-Agentes: Peligrosos/exóticos que presentan un alto riesgo de enfermedad, que ponen en riesgo la vida, infecciones del laboratorio de transmisión por aerosol o agentes relacionados con riesgos de transmisión desconocidos. -Prácticas (Además de BSL-3): Cambios de ropa antes de ingresar, ducha al salir, descontaminación de todos los materiales a la salida de las instalaciones. -Barreras primarias: Cabinas de bioseguridad Clase I, II y III junto con personal con uniforme de cuerpo entero, con presión de aire positiva -Barreras secundarias (además de BSL-3): edificio separado o zona aislada, sistema de alimentación y escape dedicados, vacío y descontaminación.
Causas más frecuentes de problemas asociados con centrífugas
-Carga mal equilibrada, se recomienda igualar los volúmenes o pesos de los tubos a centrifugar -colocación inadecuada de canastillas y/o del rotor -aceleración muy rápida -falta de rotor por corrosión o daño mecánico
Lesiones más frecuentes por equipos y aparatos
-Descarga eléctrica por manejar cables o aparatos con las manos húmedas o por falsos contactos -Lesiones por piezas que salen despedidas -Lesiones en los dedos por tratar de detenerlas con las manos
Eliminación de residuos químicos
-En el laboratorio debe existir un contenedor especial para vidrios rotos, material para absorber derrames (tierra de diatomeas, arena, carbón activado, etc.) e implementos de limpieza para recolectar desperdicios en caso de rotura de material. -Los residuos deberán ser separados y envasados en recipientes adecuados de vidrio, plástico o bolsas plásticas, perfectamente identificados y rotulados. -Todos los desechos del laboratorio deberán eliminarse de acuerdo a las normas de salubridad -Está prohibido descartar líquidos inflamables o tóxicos corrosivos por las tarjas o recipientes comunes para residuos. En cada caso deberán seguir los procedimientos establecidos por la Secretaría de Salubridad para la gestión de residuos.
Sangre
-Estado físico: Líquido -Envasado: Recipientes herméticos -Color: Rojo
Cultivos y cepas de agentes infecciosos
-Estado físico: Sólidos -Envasado: Bolsas de polietileno -Color: Rojo
Patológicos
-Estado físico: Sólidos y líquidos -Envasado: Bolsas de polietileno (sólidos), recipientes herméticos (líquidos) -Color: Amarillo
Residuos no corporales
-Estado físico: Sólidos y líquidos -Envasado: bolsas de polietileno (sólidos), recipientes herméticos (líquidos) -Color: Rojo
Objetos punzocortantes
-Estado: Sólidos -Envasado: Recipientes líquidos de polipropileno -Color: Rojo
Acciones a tomar por contingencia o emergencia con agentes infecciosos
-Informar inmediatamente al profesor responsable del laboratorio y al encargado de Bioseguridad -Toda herida o abrasión, aún los pequeños cortes que puedan producirse durante el trabajo práctico deben ser informados obligatoriamente al profesor responsable del laboratorio y al servicio médico -En caso de generación de aerosoles o inoculación accidental se deberá lavar exhaustivamente la zona afectada con un desinfectante adecuado y recurrir al servicio médico -En caso de contaminación de áreas o superficies proceder a la descontaminación con soluciones desinfectantes adecuadas
Protección para manos:
Guantes para manipulación de sustancias corrosivas, irritantes, de elevada toxicidad o de elevado poder de penetración a través de la piel .
¿Cómo interviene la concentración de iones de hidrógeno?
Interviene determinando el equilibrio iónico de los electrolitos, modificando así, la constitución molecular de las sustancias que actúan entre sí. Además, las propiedades de los anfolitos tales como los aminoácidos, dependen generalmente del pH del medio en el que se encuentran.
¿Qué depende de la buena calibración de una pipeta automática?
La exactitud del resultado
De las radiaciones ionizantes, ¿cuáles es la de mayor penetración y peligrosidad?
La radiación gamma
Recomendación básica para todos los laboratorios
Llevar el cabello recogido.
Recomendación básica para todos los laboratorios
Los mostradores deben estar limpios y ordenados. Las superficies de trabajo del laboratorio deben ser descontaminadas con un desinfectante, como el hipoclorito sódico, cuando se produzca cualquier salpicadura de un material potencialmente infeccioso y al finalizar las actividades de trabajo.
Recomendación básica para todos los laboratorios
Los objetos punzocortantes agudos (agujas, hojas de bisturí, etc.) se consideran potencialmente infecciosos y deben manejarse con extraordinario cuidado. Las agujas no deben ser recubiertas con su funda, doblarse o separarse de las jeringas.
¿Qué órganos, dentro del cuerpo humano, se encargan de mantener las concentraciones de iones hidrógeno de la sangre humana? ¿Dentro de qué rangos?
Los pulmones y el riñón. Mantienen la concentración de iones hidrógeno de la sangre humana dentro de un rango de 40+/- 5 nM que corresponden a un pH de 7.36 a 7.44.
Recomendación básica para todos los laboratorios
Mantener abrochada la bata.
Grupo II
Microorganismos causantes de enfermedades, cuyo manejo implica un riesgo para el laboratorio, aunque es raro que causen epidemias. Su prevención y tratamiento es sencillo y efectivo. No requieren de medidas de seguridad especiales. En caso de producir aerosoles se recomienda usar campana de seguridad. -RI: moderado -RC: Limitado
Grupo III
Microorganismos causantes de infecciones graves, que suponen un riesgo serio para el trabajador del laboratorio. Existe el peligro de la diseminación de la infección. Su profilaxis y tratamiento son efectivos. Usar campanas de seguridad. -RI: Alto -RC: Bajo o limitado
Grupo IV
Microorganismos causantes de infecciones graves, que suponen un riesgo serio para el trabajador del laboratorio. Mayor riesgo de diseminación de la infección a la comunidad. No existe profilaxis ni tratamiento efectivo. Usar campana de seguridad. Usar campana de seguridad. -RI: Alto -RC: Alto
Grupo I
Microorganismos comunes que rara vez causan enfermedad en individuos normales. No requieren medidas de seguridad especiales (flora intestinal). -Riesgo individual (RI): bajo -Riesgo para la Comunidad (RC): bajo
Tendencia del agua pura para ionizar
Muy baja
Recomendación básica para todos los laboratorios
No deben aplicarse cosméticos dentro del laboratorio.
¿Qué ocurre con los frascos en las mesas de trabajo?
No deberán dejarse destapados ni abandonarlos sobre las mesas de trabajo.
Recomendación básica para todos los laboratorios
No guardar alimentos o bebidas en los refrigeradores o congeladores del laboratorio.
Recomendación básica para todos los laboratorios
No llevar pulseras colgantes, mangas anchas ni prendas que puedan engancharse en equipos o máquinas.
Recomendación básica para todos los laboratorios
No se deberá pipetear nunca con la boca.
OMS (Organización Mundial de la Salud) y CDC (Centers of Disease Control)
Organizaciones internacionales que han clasificado los microorganismos en cuatro grupos, según su peligrosidad .
¿Por qué es importante conocer todas las características de un reactivo?
Para así saber de qué manera manipularlo, cómo reaccionará bajo ciertas circunstancias y qué hacer en caso de riesgo.
Regaderas de seguridad y los lavaojos de emergencia
Permiten tener un fácil acceso a un lavado de agua en caso de accidentes con sustancias tóxicas, corrosivas o peligrosas, así como en caso de derrames de muestras biológicas infecciosas.
En el agua pura, por cada ión hidrógeno, ¿cuántso iones hidroxilo exiten?
Por cada ión hidrógeno hay un ión hidroxilo. Es decir, [H+]= [OH-]
Recomendación básica para todos los laboratorios
Prohibido fumar, comer o beber.
Puesto que resulta laborioso trabajar con potencias negativas, ¿qué propuso Sörensen al respecto?
Propuso utilizar el logaritmo negativo de la concentración molar de [H+].
¿Qué pueden provocar pequeños cambios en la concentración de iones hidrógeno?
Pueden afectar la eficiencia de las enzimas como catalizadores, así como la división celular y la velocidad de crecimiento de muchos organismos.
¿Cómo pueden clasificarse las radiaciones ionizantes?
Pueden clasificarse en alfa, beta y gamma según la capacidad de penetración de las partículas.
Radiaciones ionizantes
Pueden tener naturaleza corpuscular (chorro de partículas) o electromagnética (ondulatoria), lo que supone una notable diversidad de propiedades (velocidad de propagación, masa, etc.) que les confiere muy distintas posibilidades de aplicación, así como diferente peligrosidad potencial.
Radiación ultravioleta (UV)
Radiación en longitudes de onda que van de desde los 190 hasta los 400 nanómetros (nm).
Niveles de Bioseguridad para los organismos
Representan aquellas condiciones bajo las cuales el agente puede comúnmente manipularse en forma segura.
Centrífugas
Se asocian con el mayor número de accidentes registrados, es importante que tengan una barrera sólida que evite que las piezas escapen de este aparato en caso de rotura.
Protección respiratoria:
Se recomienda utilizar cubrebocas si se manipulan compuestos volátiles de alta toxicidad y polvos irritantes.
Tóxico
Se ve un cráneo con dos huesos en forma de tacha
Explosiva
Se ve un objeto estallando en la esquina inferior izquierda de la imagen
Peligrosa para el medio ambiente
Se ve un árbol seco y un pez muerto
Irritante
Se ve una equis con una i minúscula en su extremo inferior derecho
Nocivo
Se ve una equis con una n minúscula en su extremo inferior derecho
Oxidante
Se ve una esfera con una flama
Inflamable
Se ve una flama
Corrosivo
Se ven dos tubos de ensayo derramando su contenido, uno sobre el suelo y el otro sobre una mano.
Pipetas lineales
Son aquellas pipetas en las cuales pueden medirse volúmenes de 1 mL hasta 10 mL, y serán estas las que se manejarán en el laboratorio.
Pipetas automáticas (micropipetas)
Son las pipetas que se utilizan cuando se requiere pipetear valores pequeños, por ejemplo de 2 microlitros a 1000 microlitros (1mL).
Según la Ley General del Equilibrio Ecológico y la Protección al Ambiente, ¿cuál es la definición de los residuos peligrosos?
Son todos aquellos residuos que por sus características corrosivas, reactivas, explosivas, inflamables y biológico infecciosas representan un peligro para el equilibrio ecológico o el ambiente.
¿Por qué suelen ocurrir los accidentes por equipos o aparatos de laboratorio?
Suelen ser por fallas humanas: prisas, desconocimiento del manejo, uso inadecuado, falta de mantenimiento.
Recomendación básica para todos los laboratorios
Toda persona que realice cualquier actividad dentro del laboratorio deberá estar familiarizada con la señalización, que incluye señales de advertencia, prohibición, obligación, salvamento o socorro y equipos contra incendios.
Recomendación básica para todos los laboratorios
Todo el personal debe lavarse las manos al terminar las actividades del laboratorio y quitarse la bata antes de abandonarlo.
Según la NOM-087-ECOL-SSA1-2002, ¿cómo se eliminan los desechos punzocortantes?
Todo material punzo cortante deberá desecharse en contenedores rígidos de color rojo y que contengan el símbolo universal de riesgo biológico.
Recomendación básica para todos los laboratorios
Todo material punzocortante deberá tener como destino final la incineración.
Recomendación básica para todos los laboratorios
Todos los procedimientos y manipulaciones del material potencialmente infeccioso deben ser realizados cuidadosamente para producir al mínimo la posibilidad de formación de gotas y/o aerosoles.
Recomendación básica para todos los laboratorios
Trabajar de acuerdo a las normas oficiales de salubridad de nuestro país.
Recomendación básica para todos los laboratorios
Utilizar bata de laboratorio durante el desempeño de actividades.
En general, ¿cómo pueden clasificarse los agentes cuya manipulación representa un riesgo potencial para la salud humana y de animales?
a) naturaleza química b) naturaleza física c) naturaleza biológica
Algunos riesgos de manipulación de material radioactivo
contaminación de la piel y depósito de isótopos en el cuerpo
Fórmula para calcular pH de un ácido fuerte
pH = -log[H+]
Añadir siempre ácidos al agua, nunca al revés. La adición deberá realizarse lentamente.
¿Cuál es el método adecuado para diluir ácidos fuertes?
Condiciones óptimas dadas por determinados factores, de los cuales uno de los más importantes es el pH
¿Qué necesitan todos los fenómenos biológicos para su realización?
¿Cómo se clasifican los ácidos y las bases?
Como débiles o fuertes dependiendo de su disociación.
¿Cómo se considera todo producto químico?
Como un contaminante tóxico potencial que puede presentar riesgos.
55.5 mol
Concentración molar del agua en un litro
1.8 x 10^-16= Kd= [H+][OH-]/[H2O] = 1.8 x 10^-16 mol L-1
Constante de disociación del agua
Recomendación básica para todos los laboratorios
Debe emplearse pipeta para la manipulación de cualquier líquido: especialmente en el caso de muestras biológicas o reactivos irritantes o venenosos. Está prohibido el uso de pipetas de boca.
Recomendación básica para todos los laboratorios
Debe evitarse el uso de jeringas en lugar de pipetas.
Recomendación básica para todos los laboratorios
Deben usarse guantes para impedir el contacto de la piel con las muestras biológicas, cuidando después de no recorrer todo el laboratorio apoyando los guantes manchados en los picaportes y mobiliario diverso.
¿De qué dependen tanto la exactitud como la precisión del resultado?
Del buen uso de la micropipeta
¿De qué depende la calidad de un análisis o experimento?
Depende del buen conocimiento de los instrumentos de trabajo, uno de los más importantes en esta rama de la investigación es la micropipeta.
¿Qué organizaciones internacionales se encargan de clasificar los microorganismos según su peligrosidad?
El "Center of Disease Control" (CDC) y la Organización Mundial de la Salud (OMS).
¿En dónde deben de ubicarse los ácidos fuertes o sustancias volátiles?
En campanas de almacén, exclusivas para este tipo de reactivos.
¿Qué representa el término "Nivel de Bioseguridad"?
En clasificar microorganismos en cuatro grupos según su peligrosidad. Representan aquellas condiciones bajo las cuales el agente puede comúnmente manipularse de forma segura.
¿En qué tipo de laboratorios podrán realizarse trabajos prácticos que involucren gases, vapores, humo o partículas?
En laboratorios que dispongan de campanas de extracción.
¿Qué es indispensable para el buen funcionamiento de una micropipeta?
Es indispensable no tratar de sobrepasar el volumen máximo indicado.
La radiación UV-C
Es la de menor longitud de onda, posee un efecto germicida en hongos, bacterias y virus y es utilizada en la mayoría de los laboratorios del departamento de bioquímica y biología molecular
Protección para ojos:
Es recomendable la utilización permanente de lentes de protección en el laboratorio, la cual se hace imprescindible cuando hay riesgo de salpicaduras, proyección o explosión. Deben utilizarse además de los lentes normales (proporcionan protección lateral).
NOM-087-ECOL-SSA1-2002. (Ley General del Equilibrio Ecológico y Protección del Ambiente.)
Esta define como residuos peligrosos a todos aquellos residuos que por sus características corrosivas, representan un peligro para el equilibrio ecológico o el ambiente. Los establecimientos de atención médica son regulados por la Secretaría de Salud, por lo que en la revisión de la antes mencionada, se incluye a los representantes de este sector.
Objetivo y campo de aplicación de la NOM-087-ECOL-SSA1-2002
Establece la clasificación de los residuos peligrosos biológico-infecciosos así como las especificaciones para su manejo. Es obligatoria para los establecimientos que generen residuos peligrosos biológico-infecciosos y los prestadores de servicios a terceros que tengan relación directa con los mismos.
bulbos
Este aditamento de las pipetas hace que no sea necesario pipetear con la boca
mol= masa/ peso molecular
Fórmula para calcular la concentración molar
Tratamiento y disposición de desechos biológicos
-La Norma Oficial Mexicana NOM-087-ECOL-SSA1-2002 detalla los requisitos de eliminación de desechos biológicos infecciosos. -El material biológico que se sospecha pueda tener toxinas se enviará a incinerar envuelto en bolsa roja -Todo material con alta carga de microorganismos deberá esterilizarse con autoclave -Se deberá seguir el procedimiento establecido para trasladar el material ya descontaminado hasta el lugar de almacenamiento transitorio. -Las pipetas usadas, portaobjetos, y otros elementos utilizados deberán colocarse en un recipiente con solución desinfectante para su posterior descontaminación y lavado o descarte. -Está terminantemente prohibido descartar muestras o cultivos en las tarjas -Todo material punzocortante deberá desecharse en contenedores rígidos de color rojo y que contengan el símbolo universal de riesgo biológico -Se recomienda NO encapuchar las agujas antes de ser desechadas. -Los restos de recipientes de vidrio rotos, una vez desinfectados deberán envolverse en papel grueso, cuádruple y colocado en una caja de cartón y mandarse al incinerador en bolsa roja.
Seguridad en el laboratorio
-La situación carente de riesgo o con un riegos limitado, que resulta del cumplimiento de un conjunto de normas y prácticas dictadas para lograr este fin. -Conjunto de protocolos de trabajo que debe incluir no sólo el conocimiento del riesgo y las normas de prevención, sino también la definición de las normas de actuación cuando esta se pierde y ocurre un accidente.
¿Cuáles son las causas más frecuentes para comenzar y activar un fuego en un laboratorio?
-Negligencia -Causas eléctricas (sobrecarga de circuitos, cables largos y mal colocados, equipos conectados innecesariamente) -Por flama (mecheros Bunsen encendidos y abandonados o colocados cerca de materiales inflamables)
¿Cuáles son los tipos de residuos peligrosos biológico-infecciosos?
-Sangre -Cultivos y cepas de agentes infecciosos -Patológicos -Residuos no corporales -Objetos punzocortantes
En su función a sus riesgos, ¿cómo puede clasificarse un agente de naturaleza química?
-Tóxicos -Corrosivos -Irritantes -Carcinógenos -Teratógenos -Mutagénicos -Explosivos -Inflamables
Recomendaciones al momento de trabajar con radiaciones UV
-Usar bata de manga larga para evitar exposición de la piel, ya que puede producir irritación, e incluso quemaduras de primer y segundo grado, además la exposición a la radiación uv es la causa principal de cáncer de piel y otros efectos adversos para la salud. -Utilizar siempre lentes de protección con filtro UV, ya que las radiaciones ultravioleta pueden producir lesiones oculares como irritación e inflamación de la córnea y la conjuntiva, e incluso pequeñas úlceras corneales.
Manipulación de material radioactivo
-menor exposición posible -a la mayor distancia posible de la fuente -emplear barreras de protección -reducir el tiempo de exposición
Rutas de infección en el laboratorio
-vía aérea (inhalación) -vía digestiva (ingestión) -vía parenteral (inyección a través de heridas mínimas, o por las conjuntivas).
Pasos a seguir para utilizar apropiadamente la pipeta automática
1) Sujetar la pipeta con una mano y con la otra ajustar el volumen que se desea medir utilizando el micrómetro. Asegurarse de que el número mostrado en el indicador corresponde al volumen deseado. 2) Colocar la puntilla en la parte inferior de la pipeta. 3) Presionar con el pulgar el émbolo hasta el primer tope, sumergir la puntilla en el líquido deseado y dejar regresar suavemente el émbolo a la posición original (una manipulación rápida puede causar errores en la medición). Quitar el exceso de líquido por fuera de la puntilla utilizando papel secante con mucho cuidado para evitar la contaminación del orificio de la puntilla. 4)Para descargar el líquido, aplicar la puntilla contra la pared del tubo y oprimir el botón hasta el segundo tope. 5) Para retirar la puntilla usada, presionar el botón expulsor. 6) Ajustar la pipeta.
Menciona las normas oficiales de nuestro país:
>NOM-055-ECOL-SAA1-1993 >NOM-052-ECOL-SAA1-1993 >NOM-087-ECOL-SAA1-2002 >NOM-166-SSA1-1997
¿Cuáles son las tres regiones espectrales que se reconocen dentro del rango de la radiación ultravioleta?
>UV-A (320-400 nm) >UV-B (280-320 nm) >UV-C (200-280 nm)
