Do the harlem shake 2
Cours3 , flashcard blitz : -Bioreacteur agités -culture cellulaires en mode stationnaire (T-flask, cell factory et cell cube) -Roller Bottles, Shakes-flasks et automates -Bioréacteur à fibres creuses -Microporteurs (billes = pour permettre la séparation: rétention des cellules dans les systèmes en perfusion)- permet une mise à l'échelle- bille : micro ou macro (macro protège des cisaillement) Style de question possible donnez les système pour les cellules adhérentes et les cellules en suspension ?
Cellules adhérentes : il leur faut une surface (T-flask, shake plase, bioréacteur à fibre creuse, microporteur[microbile] avantage de faire une perfusion [changer le milieu pour faire croitre les cellules plus rapidement]) Cellules en suspension : 20 000L (le besoin de production de MAbs est important)- Shake-flask
Cours 1, question Points importants des produits biotechnologiques o Répondent à un besoin médical insatisfait o Maladies rares ou orphelines o Médecine personnalisées et test diagnostic compagnon o Biosimilaires ou produits biologiques ultérieurs commencent à venir o Défis , pour ce dernier nommez 3 défis :
processus de fabrication stable et fiable développement clinique et AMM remboursement en raison des prix élevés
Cours 5, Question : Nommer tous les types de produits biologiques :
- Anticorps - Protéine recombinante/transporteurs - Protéines trappes (ca va se lier à des hormones... l'hormone est en trop grosse qté donc on veut baisser ca) - Conjugués (de 2 types de nimporte quel protéine) - Peptides - Virus - Thérapie celullaire/génique
Cours 5, Question: Quelles sont les considérations économiques pour le développement d'in produit biologique ?
- Coût de production du médicament - Notions de rendements (ex : on fait une culture cellulaire qui dire 1 mois : temps d'usine, ca compte) - Impact sur la qualité de L'APA (agent pharma actif) - Robustesse du procédé de fabrication (si on produit 100 lots, combien seront rejetés ? on check le % de succès, on vise 100%) - Normes réglementaires (PS dès qu'on rejette un lot faut le déclarer)
Cours 4, malgré un grand potentiel, surtout pour les thérapies personalisées (où on vise un population cible précise selon un test Dx), expectations coming from the genomic revolution are not being met. What are the causes ????
- Disease complexity (surtout onco) c'est difficile à gérer - hétérogénéité inter-patients, intra-patients, inter-tumeurs!!! - Nombreuses voies (pathways) pour le dev de tumeurs, donc on bloque une et elle en utilise une autre - Mécanismes de redundancy and resistance (even if you hit very hard and that very few cells are left, these can grow/replicate and relapse)
Cours 5, Question : Comment choisi-t-on le mode d'extraction celllulaire ? (2 critères)
- Le choix de l'hôte (bacterie=dense, difficile,levures, cell mammifère, plante) - Localisation de la protéine au sein de l'hôte : (corps d'inclusion, périplasme, cytoplasme, milieu extracellulaire) Précision : *Corps d'inclusion : proteines mal repliés qui forment des crystaux. Souvent c'est pas un souci même que ca peut faciliter l'excraction si le composé est concentré là! pis après solubiliser la prot d'interet et la replier par la suite (rendement du procédé pour le repliement) *Si prot est dans cytoplasme/corps d'inclusion : on fait Broyat cellulaire --> Cavitation--> Perméation *Si prot est dans le périplasme (si sécrétion) : Lysat de la parois cellulaire
Cours 3, Question pouvez vous me nommez les machines utilisés pour la mise à l'echelle, scale-down ? (4 points)
-96 puits -Microbioréacteur -Bioreacteur 3L -Pilot scale > 500L
Cours 3 , question nommez les deux équation associée à l'oxgène (une pour le taux ?
-Taux de transfert d'oxygène (OTR) -Demande en oxygène (OUR)
Cours 3, question : il y a deux type de bioréacteurs à considérer selon le type de cellules , pouvez vous les nommez ? Suite : si par exemple on fait une culture cellulaire animale, nommez deux défis spécifiques à ce type de culture ?
-cellules adhérentes -Cellules en suspension Suite : -Croissance lente et taux de production spécifiques relativement bas -Fragilité des cellules et leur sensibilité au cisaillement mécaniques, la limitation en nutriments et l'accumulation de métabolites secondaires
Cours 3, question : nommez les progrès dans la culture cellulaire en bioréacteurs (5 points)
. Avancées en génie moléculaire et cellulaire .Développement des bioréacteurs et de stratégies d'opération en mode cGMP .Développement de milieux de cultures prerformants pour la croissance en suspension et en milieu sans sérium . Développement d'outils (PAT) et de concepts avancés (QbD) pour contrôler la qualité des produits biologiques et assurer la performance et la consistance du procécdés
Cours 4, fun facts : - On the 10 top seller drugs, 7 are biologics - mAbs are the fastest growing class 2010-2015 - biologics are still a relatively small proportion of the total pharmaceutical sales, but represent all of the growth from 2010 to 2015. Donc ien a pas beaucoup, mais ils vendent bien et rapportent gros.
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Cours 5, swiiiiitccccch
Étudier cette photo, comprendre le principe de la TFF
Cours 3, question Nommez les objectifs du QbD (ICH Q8) - (6 points)
Ø Réduire les cycles de temps de production Ø Libération des lots de produits en temps réel Ø Bien du premier coup-Bien à tout les coup ! Ø Maitrise de la variabilité -‐ du Procédé -‐ de la Matière première Ø Faciliter l'amélioration continue des procédés Ø Automatisation des procédés de fabrication
Cours 5, Choisissez quels énoncés sont vrais sur la chromatographie d'affinité : 1) Capture en fonction de la structure tertiriare ou 3D 2) On peut utiliser protA, protG, glutathione etc. 3) Les temps dépendent de la constante de dissociation K-off 4) Dépend faiblement du pH et de la conductivité 5) Élution à pH très acide 6) Élution à pH très basique
1 est faux, en fonction de la structure primaire ou 3D 2 V 3 est faux, depend de K-on, la constante d'association (C'est imporant davoir un bon temps de contact, L'interaction est importante, surtout pour prot A, K-on est pas immédiate (pas comme échangeuse dion) il faut laisser du temps pour l'interaction entre protA et le Fc de l'Ac. On se donne souvent ~ 3min entre le moment où il rentre et le moment où il sort) 4 V 5 V 6 V
Cours 5, Pour la fameuse TFF, filtration tangentielle, quels énoncés sont vrais pour les fonctions: 1) Éliminer les cellules, débris cellulaires, agrégats 2) Concentrer un produit 3) Séparer en fonction de la taille 4) Séparation en fonction de la masse 5) Échanger un tampon 6) Formuler 7) Enlever un tampon
1) F 2) V 3) V 4) F 5) V 6) V 7) F * note pour ca on utilise des Filtres de poly-éther-sulfone ou de cellulose régénérée • Pores de taille calibrée : 3, 10, 30, 50, 100 kDa
Cours 5, Pour la filtration sur gel, quels énoncés sont vrais : 1) Séparation basé selon la porosité 2) Les grosses prot passent plus lentement 3) La résine est constitué de sphères poreuses de dérivés d'agarose 4) Condition douce, bon pour séparer aggrégats, fonctionne sur presque toutes les prot 5) Facile à mettre à l'échelle 6) Quantité de protéine chargée limitée 7) Tampon simple contenant 50µM de NaCl
1) F c'est selon la taille 2) F les petites passent plus lentement car elles se promènent partout et à l'intérieur des pores 3) V 4) V 5) F, difficile 6) V 7) F, 50mM
Cours 5, Pour les méthodes de formulation et d'emballage, lesquels sont vrais ? 1) Doit être classe A seulement 2) Le processus doit être rapide, automatisé et fiable 3) Permet de faire des centaines de flacons à l'heure 4) Toutes les formulations de biologiques sont liquides 5) Pour les contenants on peut utiliser des flacons de verres ou des seringues pré-remplies.
1) Faux, peut être classe A ou B, mais évidemment condition stérile pour injectable 2) V 3) F, des milliers à l'heure 4) F, peut être lyophilisé aussi 5) V
Cours 5, Choisissez quels énoncé sont vrais concernant la chromatographie par interaction hydrophobe : 1) Basé sur un principe de thermodynamie, on masque les charges de surface 2) Ici aussi on élue en changeant le pH 3) La hauteur de la colonne de résine est un facteur important à prendre en compte 4) L'interaction est dépendante de la salinité 5) On utilise les différences d'hydrophobicité pour séparer les prot
1) V 2) F!! on utilise un sel, le sulfate d'ammonium qui est très soluble et très encombrant, qui va faire lier la prot et après on diminue la salinité pour faire éluer 3) V 4) V 5) V (important à se rappeler)
Cours 5, Choisissez quels énoncés sont vrais concernant la chromatographie échangeuse d'ions: 1) Si échangeuse d'anions : la résine est chargée + 2) Si échangeuse de cathions : résine chargée - 3) Dépend du pH 4) Ne dépend pas de la force ionique 5) Pour éluer on augmente conductivité ou on change le pH : échangeuse d'anion on augmente pH et échangeuse de cation on diminue pH
1) V 2) V 3) V 4) F, ça en dépend 5) F, contraire, pour la résine chargée - (échangeuse de cation) il faut déprotonner la protéine donc on augmente le pH et vice versa PS : on change le pH au lieu de la conductivité. En effet, en évitant de rajouter des sels, on évite de faire des étapes de filtration supplémentaires et on sauve temps et argent.
Cours 5, Pour la filtration absolue, quels énoncés sont vrais : 1) Utilisé n'importe quand 2) Souvent après chaques étapes de TFF 3) Souvent après chaques étapes de chromatographie 4) Permet d'enlever des gros agrégats et cellules 5) Aussi utilisé pour la filtration virale
1) V 2) V 3) V 4) Faux, utilisé pour enlever petites quantités d'agrégats, bactéries, particules 5) V ** note pour cette technique on utilise des Filtres de poly-éther-sulfone ou de cellulose régénérée • Pores de taille calibrée : 0,8; 0,6; 0,45; 0,22 et 0,1 μm
Cours 5, Pour la clarification sur filtre épais, quels énoncés sont vrais : 1) Sert à enlever cellules 2) Sert à enlever gros agrégats 3) Sert à enlever débris cellulaires 4) Est faite seulement au début du processus 5) On contrôle le débit en fonction de la pression
1) V 2) V, en effet pour les plus petits dimères/trimères on doit utiliser la chromatographie 3) V 4) Faux, au debut pour clarifier, au milieux pour faire des echanges de tampon ou des concentrations et à la fin pour pouvoir formuler / atteindre concentration voulu avant de mettre en bouteille 5) F contraire on contrôle la pression en fonction du débit * Note : pour enlever ces déchets, on utilise les matériaux suivants : Fibre de verre, terre de diatomée, charbon activée
Cours 5, Choisissez quels énoncé sont vrais concernant la chromatographie mode MIXTE : 1) On sépare selon la charge et une interaction hydrophobe 2) L'interaction dépend encore seulement du pH 3) Donc on élue en changeant le pH 4) Nécessite un design nécessitant le "Design Experiment"
1) V, la molécule est amphiphile 2) F! hydrophobe dépend de la salinité et la charge dépend du pH! donc ça dépend des 2 3) F! on élue en changeant la salinité (gradient de NaCl) 4) V, c'est compliqué à utiliser mais ça vaut la peine
Cours 4, Pour l'étape de target selection, on a 2 choix, à partir d'une target on trouve un mAb, ou à partir d'u mAb on trouve une target. Pour la 1ere, c'est basé sur l'intégration entre la bioinformatique et les -omics. Nommer et définir chacuns des 3 types de méthode utilisés pour l'identification de la target.
1- Basé sur la glycoproteomic. Ici on check les glycoprotéines, entre différentes cellules, donc les prot de surface (surtout brain/breast). Pour faciliter la comparaison on compare une more agressive tumor cell with a less agressive tumor cell. En effet on peut pas compare sain/tumeur pcq trop hétérogène. 2- Basé sur la transcriptomic. Donc on check ce qui est transcrit, les protéines, entre différentes cellules. Encore une fois on compare less agressive vs more agressive tumor cells 3- "Genomic" on veut trouver un gène associé avec un mauvais prognosis pour une maladie. On utilise Novel algorithm/Network analysis. AKA : goal is to find the most important differences in the omics data based on algorithm ** Note Après avoir choisi une panoplies de target, on va aller chercher la meilleure (prioritization). Pour faire ça on va utiliser -Expert literature review - Assessment of the nature and number of available studies - Rapid intelectual property analysis - Grouping of several targets into families (trend)
Cours 4, Lors de la sélection du candidat, on passe à travers 7 étapes. Mettez les dans l'ordre : Candidate selection, Lead optimization, Lead validation, Target ID/Validation, Screening, Hit selection, Ab Library Generation
1- Target ID/validation 2- Ab library generation 3- Screening 4- Hit selection 5- Lead validation 6- Lead optimization 7- Candidate selection
Cours 5 , Question : Quels sont les 3 types de dosage ? décrivez les vite vite.
1. Analyse de la qualité (QC quality control) : dosages réalisés pour chaque lot produit et servant à indiquer que le procédé à permis de fabriquer le produit souhaité. 2. Analyse durant le procédé de fabrication : vérifier la qualité des intermédiaires du procédé utilisé pendant le développement. Aussi les dosages nécessaires à la réalisation de la fabrication. Ex. : nb de cycles de chromatographie, répétition d'étape, mesure de l'intégrité du filtre viral 3. Analyse de caractérisation : chose faite en dehors du syst réglemantaire (≠soumis au normes), permet d'aller plus loin dans la compréhension du produit présenté au syst regl.
Cours 4, classer en ordre décroissant des ventes concernant l'application cliniques des mAbs : 1) oncologies 2) maladies infectieuses 3) Hémostase 4) maladies autoimmunes/inflammatoire 5) Néovasculaire (oeil)
1er) onco en effet c'est 50.8% 2e) autoimm/inflamm en effet c'est 37,8% 3e) infectious (2.4%) 4e) néovasc (7.1%) 5e) hémostase (1.7%)
Cours 4, à la fin de la target identification, après la sous-étape de target prioritization, combien de target on devrait avoir environ? 1) 1 2) 5 3) 14 4) 30 5) 40
5) 40 En effet on veut 40 cibles où un mAb offrerait une opportunité compétitive raisonnable.
Cours 1, question : Pour la PK des AC Mo décrire les points suivants : Absorption (3 points) Distribution (1 points) Élimination (5 points et 2 sous-points) T1/2 (3points)
Absorption Par les réseaux lymphatiques (IM/SC) Tmax (2-14 jours) F = 52%-80% (clairance présystémique) Distribution Paracellulaire et transcellulaire Élimination et métabolisme Catabolisme intra-cellulaire -Non-Spécifique Dégradation des IgG comme les autres protéines circulantes par les cellules endothéliales (Non-saturable) -Spécifique : élimination après liaison sur la cible (SATURABLE) Clairance : récepteur Fc ou par la disposition du complexe ligand-AcMo Métabolisme par des enzymes protéolytiques Métabolites actifs : effet local ou systémique Analyse de corrélation clinique : Analyse PK (immuno-essai et yrdy biologique) La PK (T1/2) : Augmente avec le poids T1/2 grand : recyclage (FcRn) Peut changer : Niveau d'expression de la cible et complexe Ac-Ag
Cours 5, Sssssswwwwiiitch
Apprenez ça par coeur bande de connard Procédé de fabrication de l'asfotase alpha
Cours 4, Quels étapes suivent la target identification? et quels sont les 2 types de mAb qu'on fait ?
Après avoir trouvé nos 40 cibles, on va générer nos anticorps par immunization et ensuite optimiser les mAb. On fait des mouse et des camelid mAb
Cours 1, Nice to know : Les produits biotechnologiques génèrent 71% des revenus des 10 produits pharma-biotech les plus vendus au monde en 2012 vs en 2001
Aussi Une croissance importante au niveau des ventes aux USA avec 20-30% des ventes mondiales Selon les 5 classes le potentiel est variable, le succès commercial n'est jamais assurés : Ex (hormones) Lantus NovoLog HumaLog sont des insulines prolongées et représente un % très important des ventes (ce sont des produit vedettes dont l'indication est restreinte : Diabète pour lesquels il y a une valeur ajoutée importante : une prise par jour
Cours1, question pour les biologiques nommez les avantages et les inconvénients ?
Avantages Cible : surface ou circulant Demi-vie : prolongée Spécificité :très haute Administration : moins fréquente Potentiel d'interactions : faible Potentiel off target : moins important Maladie rare Inconvénients Administration : parentérale Accès CNS : difficile Immunogénicité possible Production biologique : hétérogène Coût de traitement élevé
Cours1, question pour les petites molécules nommez les avantages et les inconvénients ?
Avantages Cible : surface ou intracellulaire Demi-vie : variable Spécificité : bonne Administration : orale Immunogénicité : rare Accès CNS : possible Synthèse chimique : homogène Inconvénients Potentiel off target : très élevé Administration : plus fréquente Potentiel d'interactions : élevé Maladie rare : moins applicable
Cours 3, question: pour les procédés Batch et fed-batch, c'est le bilan de masse, pouvez décrire ce qui se passe mathématiquement
Batch : Inlet+ Génération = outlet+ Accumulation Inlet = entrée et outlet = sorti, il s'annule donc la génération = accumulation donc dans l'équation Taux de production = productivité cellulaire x la concentration cellulaire. la productivité est constante Fed-Batch : entrée+ génération = accumulation la productivité n'est donc pas constante !!
Cours 5, question : Qu'entend-on par "Procédés en aval" et quels produits en font partie?
C'est la science de la séparation, on veut éviter d'introduire des composés indésirables dans le produit final pour éviter les risques de toxicités causés par les composantes du processus de fabrication en aval (en amont aussi). Mais aussi stabilisation de l'agent pharmaceutique actif (APA/API) (ex: on inhibe? les enzymes qui pourraient dégrader le produit) Ça inclut les : Protéines/Virus/Cellules/siRNA s'il y alieu
Cours 1, nice to know : Étude de cas : La crise de l'ébola :
C'est un exemple qui démontrer l'avantage d'utiliser la biotechnologie vs les petites molécules l'approbation et la mise en œuvre est accélérée Constat : les patients atteints peuvent développer une immunité acquise (solution prophylactique et thérapeutique) Développement de Vaccins actuellement : TKM-Ebola et Z-MaPP
Cours 3, question nommez trouver le faux pour augmenter le transfert d'O2 : A) Diminuer la taille des bulles d'O2 B) Réduire la résistance à l'intervace C) Utiliser l'air au lieu de l'O2, maitenir CL élevé
C) Utiliser l'air au lieu de l'O2, maitenir CL élevé Note : A) est vrai : on augmente la surface d'échange <<a>> B) est vrai : on augmente k1 C) est faux : Utiliser l'O2 au lieu de l'air, maitenir CL bas (augmenter C*-CL)
Cours 3, question, Trouver l'énoncé FAUX :quand on parle du bioréacteur on parle d'un système spécifiquement conçu pour maintenir un environnement et des condition d'opération adéquats donc de : A) d'un environnement aseptique B) Permettre l'approvisionnement en nutriments C) température, pH, O2 dissous contrôlés D) Contrôle de la mousse n'est pas nécessaire
D) D) Contrôle de la mousse EST nécessaire et important
Cours 3, question les premiers biologiques développés dans un système microbien sont : A) hormone de croissance B)insuline C) anticorps D) A+B Vrai ou Faux, avec ce système on peut procéder à des modification post-traducionnel Vrai ou Faux : ce sont les cellules <<hydridomes>> qui ont été utilisée dans la technologie de l'ADN recombinant Donnez un autre système d'expression récemment utilisé ?
D) A+B Suite :Faux On parle des ponts bisulfite et des glycosylation, ça requiert des système d'expression MAMMIFÈRE Suite :Vrai Suite : Autre système d'expression : Les cellules d'insectes!!!! rBaculovirus - infection de cellules d'insectes : protéine recombinante (production de hémagglutinine), virus like particule, vaccin baculovirus Vaccin
Cours 1, question :Sur le plan règlementaire qui évalue les produits biologiques ?
DPBTG : Direction des produits biologiques et des thérapies géniques
Cours 3, question, trouver le FAUX, la demande en oxygène se définit par : A) un métabolisme énergétique (catabolisme) B) Mécanisme de régulation du métabolisme C) O2 est un co-substrat dans la biosynthèse des composants cellulaires (anabolisme) D) Dans l'élémination des déchets métabolique E) Aucun des énoncés est faux Suite, trouvez le Faux les produit d'oxydation sont : A) H2O B)O2 C) Métabolites D) Biomasse
E) Aucun des énoncés est faux (maltais style !!!) Suite : B) est Faux, la vrai réponse CO2
Cours 5, V ou F À cause des avancées technologiques, les coûts de production sont de moins en moins cher pour les biologiques.
F En effet la réglementation est de plus en plus sévère. Mais l'échelle qui augmente explique aussi. (plus ou moins clair ce boute, au pire se rappeler les mots : les coûts de production sont de +en+ importants pour la mise à l'échelle)
Cours 5, V ou F On utillise encore surtout le tamis moléculaire (filtration sur gel) car il fait ses preuves, même s'il vieux.
F On aime mieux TFF (filtration tangentielle) qui est meilleure pour éliminer les petites molécules... ou encore la chromatographie de polissage. Le tamis est encore utilisé pour changer le tampon ou enlever les aggrégats.
Cours 5, Pour la filtration virale, V ou F - La drug substance (substance active) nécessite la stérélité absolue.
F Pour la drug substance on fait seulement le bioburden, donc on vise aseptique. C'est pour le drug product, donc le produit final, qu'on vise la stérélité
Cours 1, Vrai ou Faux : en ordre décroissant voici Les biothech par classe de vente : o Cytokines o Protéines de fusion o Facteurs de croissance o Hormones o Anticorps monoclonaux
F o Anticorps monoclonaux o Hormones o Facteurs de croissance o Protéines de fusion o Cytokines
Cours 1, question : Vrai ou Faux Concernant les Ac : o Mab : Murin o Ximab : chimérique o Zumab : Humain o Mumab : humanisé
F o Mab : Murin o Ximab : chimérique o Zumab : humanisé o Mumab : Humain
Cours 5, Question : V ou F : durant toutes les phases du développement, pour les dosages de caractérisation on veut aller le plus en détail possible, incluant les méthodes orthogonales
FAUX seulement P2,3 et commercial En phase 1 on fait seulement les dosages incontournables. *Pour ces types de dosage, basé surtout sur des mesure biophysique et spectroscopique dosage compliqué, long, beaucoup de MS pour la proteine intact ou la protéine digérée
Cours 5, Question : V ou F : durant toutes les phases du développement, les dosages de contrôle de qualité doivent être validés.
FAUX seulement pour phase 3 et phase commerciale. Pour phase 1 et 2 : les dosages sont "minimalement qualifiés". On dit aussi qu'ils sont qualifiés En P3 et commerciale on dit qu'ils sont validés, selon le guide de validation **QCH-Q2B** Le guide pour établir les spécification c'est **QCH-Q6B** qui dit à l'intérieur de quelles valeurs le produit rencontre les normes souhaitées *Biocharge/Bioburden : présence de microorganismes glissés dans le procédé de fabricaiton. Norme = 1cfu, colony forming unit / 10mL. TRÈS important si c'est un injectable. OR ** --> en P1 et P2 pour ces valeurs on parle de la substance médicamenteuse!! pas du produit fini. Vu que cest un injectable on va devoir regarder la stérilité, donc bioburden beaucoup plus poussé au produit final.
Cours 3, Vrai ou Faux : les bioréacteurs à usage unique (SUB) sont fait à partir de plastique, donc ne respectent pas les cGMP Suite, Vrai ou faux, ils ont un seul type de configuration, mais opèrent selon différent mode ? Suite, Vrai ou Faux, leurs principaux avantages : -faibles coûts d'investissement -Les coûts de validation du nettoyage et de la stérilisation
Faux, ça respecte les cGMP Note : le matériel plastiques inclue : -les connections et filtres -sont stériles et prêt à l'usage -ils sont compatibles avec le mode de production cGMPO Suite : FAUx Disponibles pour différentes configurations : culture en suspension , avec microprteur Suite : Vrai
Cours 1, question : On classifie les protéines thérapeutique selon 3 classes : Groupe 1 : protéines avec une activité enzymatique ou régulatrice Groupe 2 : Protéines visant une cible spécifique d'intérêt Groupe 3 : Vaccins avec protéines recombinantes donnez les caractéristiques de chacune
Groupe1 : Remplacement d'une protéine anormale ou déficiente (Insuline, hémostase, déficience d'enzyme métabolique) Amplification d'une voie de signalisation (hématopoïèse, immunorégulation) Dotées d'une nouvelle fonction ou activité (dégradation enzymatique de macromolécules, de petites molécules) Groupe 2: Interférence avec une molécule ou un organisme (Cancer, Immunorégulation, Maladies pulmonaires Capable de faciliter la distribution systématique d'autres molécules ou protéines Groupe 3: Protection contre agents infectieux Traitement d'une maladie-immune Vaccin contre le Cancer (Ex : Vaccin contre le cancer métastatique de la prostate)
Cours 5, Question, swwwwwitch! a) Cell removal b) Cell wall disruption c) Cell lysis d) Cell debris removal e) Intracellular expression f) Extracellular expression g) Solubilization h) Refolding i) Insoluble in cytoplasm
Identifier correctement chacuns des termes manquants des différents procédérés de purification.
Cours 5, Question : switch a) Rendement de culture (g/L) b) Rendement de récupération (%) c) Rendement global (g) d) RÉcolte
Identifier les éléments manquants de rendement des étapes du procédé:
Cours 1, question : Pour les AC Mo décrire les points suivants : Implications pour l'évaluation clinique en Phase I (2 points) Implications pour l'évaluation clinique en Phase II ( 6 points et 3 sous points)
Implications pour l'évaluation clinique en P1 Choix de doses adaptées au poids ou doses fixes ? Administration initiale IV ou SC Implications pour l'évaluation clinique en Phase II Choix de la dose à étudier compliquée : il faut un de critère de réponse adéquat Relation Concentration-Tox mal connue Une longue période d'observation peut être nécessaire après administration Limitation de l'usage de devis chassé-croisé Potentiel d'interférence avec les évaluations précoces d'immunogénicité Risque de réactions immunologiques suivant les premières doses : - Au syndrome de relargage des cytokines -Des réactions anaphylactiques -Des réactions croisées, liées à la présence de l'antigène-cible Dans les tissus sains Note : Lorsqu'on vise à faire une co-administration de petites molécules avec des protéines thérapeutiques il faudra considérer des interactions : avec les CYPs ou les transporteurs
Cours 5, Question : Quels sont les principaux éléments de qualités du produit et d'impuretés venant de l'hôte qu'il est important de regarder ?
Impuretés : ADN, protéines, lipides, glycans Qualité : Glycosylation, repliement, dégradation
Cours 1, question : Nommez moi un des premier produit biologique ?
L'antitoxine diphtérique (1890). Diphtérie causé par la bacile Gram+ d'une bactérie. Au début on prenait du sérum d'antitoxine de cobayes exposés. Ensuite pour augmenter la production on a pris le sérum du cheval. Finalement de nos jours on donne un vaccin Ac neutralisant la toxine.
Cours 5, Question : Nommer un avantage et un désavantage du système CHO.
La prot est sécrétée donc très peu de protease secrété. Ceci diminue la dégradation de notre protéine. Le seul souci c'est que des enzymes comme des glycosidase peuvent détruire le site de glycosylation sur la prot en voie d'être secrétée, l'empêchant ainsi d'être sécrétée.
Cours 5, QUelle mesure de performance est utilisée pour la clarification sur fitlre épais ?
La turbidité : cest ce qui va rester dans la solution (coloide) ca se mesure facilement avec un turbidimetre et on doit avoir des specificaitons pour un niveau de trubdiuté accpetable sinon les filtres terminaux vont bloquer après
Cours 5, Question : À quoi sert les dosages et en quoi consistent-ils ?
On veut évaluer la qualité du produit et détecter/quantifier les impuretés. Qualité : Modif post-trad (glyco, pont disulfure, ligand), structure primaire, puissance(performance du produit in vitro) Impuretés : Agrégation, ADN de l'hôte, Protéines de l'hôte, Pigments (polyphénols, Flavonoïdes), Virus, Substance chimiques
Cours 5, Étude : Swwiiiiiitchez!
Pas de question ici, mais bien retenir chaque sites et chaques détails
Cours 5, Dans les procédé typique, on fait d'abord une clarification, une chromatographique avec protéine A, une chromatographie échangeuse de cation, une membrane échangeuse d'anion, une filtration virale et finalement une filtration TFF avant de faire le remplissage. Nommer tous les déchets reliés au processus de fabrication, et tous les contaminants reliés au produit qu'on veut enlever durant ces étapes.
Reliés au processus : - Ligant qui s'est échappé - Host Cell DNA - Host cell Prot (HCP, durant chromato échangeuse) - Endotoxine (on vise aseptique!) - Bioburden (charge virale) - Chemicals (de la chromatographie) Reliés au produits : - Agrégats (HMW) - Morceaux de prot (LMW) - Product related changes - Hétérogénéité (prot diff causés par glycosylation diff) - Glycosylation - Efficacité diff
Cours 1, question : Qu'est-ce qu'un produit biologique ?
Règlement sur la loi sur des aliments et drogues du Canada (annexe D) : Produit particulier (insuline)/Classes de produits (agents immunisants)/ Sources particulières (sauf les antibiotiques)/ Méthodologie (ADN recombinant). Fabriqués à partir ou en utilisant des animaux ou des microorganismes. Par exemple : Sang et composants sanguins, anticorps monoclonaux, cytokines, hormones protéiques et les produits de thérapie génique.
Cours 3, question que représente l'équation des bioréacteurs agitée : Yp = Qp X ?
Taux de production = productivité cellulaire x la concentration cellulaire
Cours 5, Nommez 3 paramètres généraux importants pour une chromatographie hydrophobe.
Température, la résine utilisée, la hauteur de la colonne
Cours 5, Tous les processus en amont doivent amener à un produit qui sera transférable à l'échelle industriel si on veut être commercialisé. V ou F : Les laboratoires doivent tous suivre les BPF et tous les matériaux doivent être produits sous un système qualifié.
V Pour la mise à l'échelle, on veut le procédé le plus simple possible. Il faut respecter les normes réglementaires et les BPF.
Cours 5, V ou F Pour la chromatographie (qui sépare selon charge, taille, motif, hydrophobicité) la mise à l'échelle est facile.
V en effet c'est assez linéaire donc facile à prévoir
Cours 1, question : Vrai ou Faux La majorité des produits finis sont présenté sous forme parentérale IV >SC >IM
VRAI Note o La substance active est généralement conservée à -20oC u -70oC o La décongélation en conditions défavorables peut causer l'agrégation et la désamination des protéines o La formulation finale de la substance active peut inclure des étapes de diafilitration et dilution o La formulation finale est microfiltrée et/ou assemblée avec des composants préparés aseptiquement
Cours 5, Question : V ou F : Pour les dosages de caractérisation, même s'ils ne sont pas soumis aux normes réglementaires, on s'assurer qu'ils soit le plus contrôlé et reproductible possible.
VRAI ! il faut un bon fondement scientifique pas de la science de coin de table car on utilise quand meme cette info au niveau réglementaire
Cours 3, question donnez des systèmes d'expressions utilisé en industrie pour : -Les vaccins humains (3 points) -Les protéines recombinantes (4 points)
Vaccins humains : • Cellule primaire : cellule embryonnaires de poulet • Souche cellulaire : cellule fibroblaste humaines du poumon (réplication limitée) • Lignées cellulaires établies : HEK293, Vero, MDCK (réplication indéfinie) Les protéines recombinantes • Cellules dérivées de l'ovaire de hamster : CHO (dominant dans l'industrie) • Cellules dérivées d'organes humains (HEK-293) • Cellules dérivées de souris : hybridomes, C-127 • Cellules dérivée de hamster Syrien : BHK
Cours 1, question , Vrai ou Faux : l'évaluation pré-clinique des produits issus de la biotechnologie est faite selon la ligne directrice ICH S6(R1)
Vrai
Cours 3, question Vrai ou Faux, Des protéines thérapeutiques telle que l'insuline, l'urokinase, le facteur VIII et l'interferon ont précédés la technologie par ADN recombinant
Vrai
Cours 3, Nice to know ?! Bilan de masse en O2 dans un bioréacteur : Condition en régime permanent : KLa (C*-CL) = qX Vrai ou Faux CL est constant Suite: Nommez les facteurs qui peuvent affecter la valeur de Kla
Vrai Note : -De ce bilan de masse on peut determiner la concentration maximale en biomasse si le système n'est pas limite par un autre substrat et -Pour une concentration de biomasse donnée on peut déterminer le Kla minimum requis pour maintenir la concentration en oxygène dissous au dessus d'un seuil critique de concentration Suite : Configuration du bioréacteur ( géométrie, aération and agitation) La rétention du gaz et le dimension des bulles Le configuration de l'agitateur et sa vitesse de rotation La température et la pressure dans le bioréacteur Autres paramètres physicochimiques des milieu de culture qui peuvent affecter la solubilité et le transfert d'oxygene. - Viscosité - Composition - Présence et accumulation de biomasse
Associez chacune des impuretés suivantes à leur(s) hôte(s) respectif(s) : a) Pigments b) Glycosylation réduite c) Ø de glycosylaiton d) Corps d'inclusion e) Protéase f) LPS (lipopolysaccharide) g) Extraction des feuilles h) Virus 1) bactéries 2) levures 3) Insectes 4) Plantes 5) Plasma humain 6) Cell mammifère
a) 2 b) 2,3 c) 1 d) 1 e) 1 f) 1 g) 4 h) 5,6 * Glycosylation réduite : pas les mêmes type de glycosylation quon va retrouver chez lhumain = tjrs un risque d'antigénicité * Pigment : faut s'en débarasser mélange de protéines pas facile *Protéase : forte présence parfois, certaine souche de bactéries ont vu leur protéase retirée du genome pour pas affecter nos proteines * LPS : attention au LPS! endotoxines ont un effet pyrétique *De façon générale, toxicité principale = rx immunitaire *Extraction des feuilles : tres difficile a cause de l'extraction des composés polyphenolique *virus : attention au risque possible de réactivation d'une sqc d'ADN de type virale endormi!
Cours 5, question : Choisissez la bonne chaine d'approvisionnement. a) On part des matériaux brutes et d'une banque de cellules. On fait ensuite notre culture cellulaire (sous controle QC/QA) pour obtenir protéine d'intérêt, suivi de la purification (sous controle QC), puis enfin la formulation (sous controle QC) pour obtenir ce qu'on appelle la Drug Substance. On fait ensuite le fill finish (sous controle QC) pour obtenir le Drug Product qui passera au QC/QA. b) On part des matériaux brutes et d'une banque de cellules, ces matériaux passent au QA. On fait ensuite notre culture cellulaire (sous controle QC) pour obtenir protéine d'intérêt, suivi de la purification (sous controle QC), puis enfin la formulation (sous controle QC) pour obtenir ce qu'on appelle la Drug Substance, qui passe au QA. On fait ensuite le Fill Finish (sous controle QC) pour obtenir le Drug Product qui passera au QA. c) On part des matériaux brutes et d'une banque de cellules, ces matériaux passent au QC. On fait ensuite notre culture cellulaire (sous controle QA) pour obtenir protéine d'intérêt, suivi de la purification (sous controle QA), puis enfin la formulation (sous controle QA) pour obtenir ce qu'on appelle la Drug Substance, qui passe au QC. On fait ensuite le fill finish (sous controle QA) pour obtenir le Drug Product qui passera au QC. d) On part des matériaux brutes, ces matériaux passent au QC. On fait ensuite notre culture cellulaire (sous controle QA) pour obtenir protéine d'intérêt, suivi de la purification (sous controle QA), puis enfin la formulation (sous controle QA) pour obtenir ce qu'on appelle la Drug Substance, qui passe au QC. On fait ensuite le fill finish (sous controle QA) pour obtenir le Drug Product qui passera au QC. e) On part des matériaux brutes, ces matériaux passent au QA. On fait ensuite notre culture cellulaire (sous controle QC) pour obtenir protéine d'intérêt, suivi de la purification (sous controle QC), puis enfin la formulation (sous controle QC) pour obtenir ce qu'on appelle la Drug Substance, qui passe au QA. On fait ensuite le fill finish (sous controle QC) pour obtenir le Drug Product qui passera au QA.
b Important de faire un contrôle QA/QC approprié à chaques étapes. Assurance qualité (QA) c'est pour les produits. Contrôle qualité (QC) c'est pour les étapes de fabrication. Notons aussi qu'il est possible de faire un Clinical / commercial inventory après avoir fabriqué le Drug substance, avant le Fill Finish.
Cours 5, question : Le coût de revient inclut : a) matière première, main d'oeuvre, analyse, système qualité, infrastructure b) développement, mise en place, transfert technologique, matière première, main d'oeuvre, analyse, système qualité, infrastructure c) développement, matière première, main d'oeuvre, analyse, système qualité, infrastructure d) développement, mise en place, transfert technologique, matière première, main d'oeuvre, analyse, système qualité, infrastructure, formulation, gestion de risque e) développement, mise en place, transfert technologique, matière première, main d'oeuvre, analyse, système qualité, infrastructure, étude de marché
b) développement, mise en place, transfert technologique, matière première, main d'oeuvre, analyse, système qualité, infrastructure
Cours 1 , question : Nommez deux façons d'analyser les caractéristiques des biologiques ?
o Analyse physico-chimique et biochimique Caractéristique physique Analyse de pureté, intégrité protéinique, glycosylation Recherche d'agrégats dissociables Évaluation de l'hétérogénéité de charge Évaluation conformationnelle de biomécule o Analyse biologique et immunologique Généralement visant à évaluer la puissance d'activité Évaluation d'activité sur un bio-essai cellulaire basé sur l'inhibition ou la croissance cellulaire Évaluation de la fonction par immuno essai Indentification de gain ou perte de fonction pour protéines thérapeutiques
Cours 3, question nommez les stratégies de productions (4 points) et les avantages et limites de chacune
o Batch (équation de bilan de masse) Avantage : Opération relativement simple Risques de contamination réduis Simple mise-à l'échelle Inconvénients : Conditions d'opération en constante variation Concentration cellulaire faible Faible productivité Dégradation possible du produit o Fed-Batch (on ajoute quelque chose dans le réacteur, le volume change, ça devient un débit, exemple ajout de nutriment). Avantages: Opération modérément complexe Croissance cellulaire prolongée Mise à l'échelle simple Désavantage : Conditions en constant changement en fonction du temps Dégradation possible du produit o Continuous (en clinique) Avantage Réduction de la prédiction d'inhibiteurs Environnement cellulaire stable (Régime permanent) Qualité du produit possiblement préservé Mode d'opération idéal pour la caractérisation de la physiologie cellulaire (chemostat) Désavantage : Concentrations cellulaire faibles risque de Faible productivité Opération plus complexe o Perfusion (en industrie, extraction du produit et préservation de produit instable) Avantage Addition continue de nutriments Élimination continue des métabolites toxiques Hautes concentration cellulaire et productivités Qualité de produit maintenue Désavantage Opérations plus complexes Système de rétention cellulaire Les taux de perfusion doit être adéquatement ajuster au système
Cours 3, question: Quelle sont les outils/étape du QbD ? (7 points)
o CQA (critical quality attributes) : exemple glycosylation Définir les critères de qualité du produit/médicaments o CPP (critical process paramrters) : PH, Temperature Connaître les paramètres du procédé de fabrication qui impacte cette qualité o Risk analysis tools : si il y a une variation quel risque est associé sur la qualité du produit final ? Connaître la variabilité de ces paramètres et le risques associé sur la qualité du produit (tester le scale down par exemple) o DOE (plan d'expérience) : minimiser le nombre d'expérience (évaluation des tous les paramètres en même temps o Design Space : on donne une fourchette des paramètres Définir un espace de travail ou la qualité est maitrisé Définir les conditions de fonctionnement optimales du process, éliminer les paramètres procédés non significatifs o PAT (process analytical technologies) : ELISA, transferrt d'oxygène, volume de cellule Définir l'espace de contrôle associé (soutenir l'inovation et l'efficacité du développement, de la fabrication et de l'assurance qualité pharmaceutique)
Cours 1, question : Les études cliniques sont prédictives mais pas toujours requise, pourquoi ? (3 points)
o Car ça été déjà établit avec le biologique de référence (donc c'est la pré-IND qui est sévère) o Pas de PHASE II : dose déjà établie o Devis d'étude : un seuil d'évidence plus élevé pour démontrer l'interchangeabilité (FDA) en plus d'être un substitut alternatif
Cours 1, question : Sur quoi va dépendre le choix de la source de production des produits biologiques ? (3 points)
o Caractéristiques du produit final o L'efficience o Coût du système de production
Cours 1, question Quels sont les considérations cliniques à prendre en compte ?
o Choix de la dose et justification du dosage o Études de populations spéciales o Démonstration robuste d'efficacité o Bonne tolérance o Précautions et contre-indications o Rapport bénéfice-risque favorable o Délai possible pre-IND pour la mise au point du 1er lot de fabrication o Maitrise du contrôle de qualité sur les lots subséquents o Limitation des devis d'études en raison de demi-vie prolongée o Intervalles de dosages imposent des études souvent plus longues o Évaluation du potentiel d'immunogénicité toujours requise
Cours 3, question Nommez les trois procédés en amont dans production générique des biologiques ?
o Culture en préparation o Entrée dans le bioréacteur o Collecte du produit
Cours 3, question, pour la demande en oxygène ( des procédés aérobics) , quelles sont les deux éléments à considérer pour le bilan de masse ?
o Demande en O2 -Phénotype cellulaire -Activité métabolique o Approvisionnement -Morphologie cellulaire -Solubilité en O2 -Transfert par agitation ou aération
Cours 1 question : Le processus de fabrication peut être décrit comme suit : o Sujet à des instabilités o Difficile à contrôler de lots en lots o Susceptibles à changements dû aux nouvelles technologies Nommez 3 points des difficultés associé au contrôle des lots Nommez 1 point sur la susceptibilité aux changements
o Difficile à contrôler de lots en lots La bioéquivalence de chaque lot doit être évalué Définir par le processus de fabrication Caractérisation du produit nécessite des tests complexes en amont et en aval o Susceptibles à changements dû aux nouvelles technologies La gestion des changements de processus requiert une stratégie d'évaluation de comparabilité pré et post en conformité avec exigences de BPF
Cours 1, Nice to know : C'est grâce aux découvertes et à l'évolution des ressources technologiques qu'il est possible de nos jours d'avoir des procédés industriels pour la production à grande échelles de nouveaux produits à titre d'exemple :
o Développement de la technologie de l'ADN recombinant o Développement de la production d'AC monoclonaux o Développement de la technique PCR o Techniques d'inhibition géniques avec l'ARN interférent double-brin o Technique de reprogrammation de cellules souches
Cours 1, question : Nommez trois points associés à la stabilité du produit actif
o Exposition à la lumière et à la température ambiante peut causer une dégradation du produit o Des limites d'exposition cumulative doivent être établies pendant le processus de fabrication o Protocole d'évaluation continue des paramètres de stabilité devra être mis en place
Cours1, question: quelles son tes questions à se poser avant de commence la R&D :
o Facteurs pronostiques qui influencent l'apparition, la progression, la réponse au Rx? o Comment, quand, chez qui ? quelles cellules sont impliquées ? o Quelle est l'importance du besoin médical insatisfait ? o Origine génétique connue ? Quels gènes sont activés ou supprimés ? Protéines attientes vs protéines normales ? o Y-a-t-il un modèle in vitro ou in vivo pour faire une POC précoce ? o Si la maladie est due à un pathogène, quelle est la relation pathogène-hôte ? L'objectif est de comprendre la biologie sous-jacente à la maladie et responsable de ses manifestations.
Cours1 , question : donnez des exemples de protéines recombinantes :
o Insuline o Hormone de croissance o INF-a o EPO o Facteur de croissance Note : Un autre exemple révolutionnaire quand a la production industriel : une dose de 10 mg d'EPO par an est suffisante pour traiter une dialyse rénale vs l'extraction d'EPO de 2550 litre chez les patients anémiques
Cours 1, question : Nommez trois associé aux composants associés au produit
o Le relâchement de certaines substances des composants peut altérer la pureté ou la puissance du produit fini o Des solutions non tamponnées peuvent subir des modifications de pH par l'acide libéré des contenants de verre o Les embouts de caoutchouc peuvent augmenter la teneur en humidité d'un lyophilisat
Cours1 , Nice to know • Les AC monoclonaux comptent pour 37% de tous les produits biotech en essais cliniques • Une faible fraction des produits biologiques en développement arrivent à franchir le seuil de l'approbation Une petite question • Qui produit les biotechnologies principalement ?
o Les petites biotechs o Les moyennes biotechs
Cours 1, difficile à mettre sous forme de question : Le processus pour une protéine recombinante ou un AcMo o Système d'expression : E-coli , levure ou cellule CHO o La mise au point requiert du temps + validation exhaustive o Les ajustements (d'echelle, tests, technologie) sont fréquents o L'impact sur le produit fini de tout changement doit être évalu. o Un contrôle de qualité exhaustif et continu est requis
o Les étapes de production importante : Du labo à la production en bioréacteur Atteinte des cibles de production selon le mode choisi de fermentation ou culture cellulaire Les concentration du produit en vrac impliquera soit une étape de filtration ou centrifugation5 La purification se fera par diverses méthodes de chromatographie + précipitation La diafiltration permet de retirer les petites molécules incorporées dans le procédé de purification Pour les dérivés de culture cellulaire, la nanofiltratione t le traitement à bas pH
Cours1, question : Quelles considérations faut il anticiper pour les AC Mo ?
o Neutralisants ou agonistes o Portion Fab détermine l'affinité avec l'Ag (de surface ou circulant) o Portion Fc responsable du recrutement des effeteurs immunitaires : complément C1q ou cellules porteuses du récepteur FccyRIIIA/CD16 o P la PK
Cours 1, Nice to know étude de cas : Exemple pour l'arthrite rhumatoïde : cibler les cytokines et moduler la réponse immunitaire pour ralentir ou cesser la progression de la maladie. Les agents biologiques : combler l'absence et l'inssufisance des traitements conventionnels. Pour les biologiques il n'existe pas le biomarqueurs prédictifs de la réponse. Voici les points important considéré
o Programme de développement o Indication o Études de PK, dose réponse et interactions o Études confirmatoire d'efficacité o Études de tolérance et sécurité UNE ATTENTION PARTICULIÈRE pour évaluer le risque des EIs Si l'effet sur le système immunitaire est anticipable alors il faut développer un test diagnostic et pronostique avec l'aide des biomarqueurs afin de permettre une prévention de ces EIs. Il est possible d'expliquer les EIs par : Les caractéristiques du produit Cible thérapeutique Formulation et emballage Horaires d'administration, route et doses Caractéristiques individuelles des patients Maladies sous traitement
Cours1 question :Comment l'ingénierie moléculaire à contribuer à l'élaboration de différente protéines thérapeutiques ? (4 points)
o Prolongement de la demi-vie (glycosylation , PEG, Portion Fc) o Amélioration de l'affinité pour les cibles thérapeutiques o Possibilité de liaison aux récepteurs du complément Fcy ou FcRn o Création d'Ac conjugués ou bispécifiques Note : les produits issus de la biotechnologie sont en constante évolution. Le futur : thérapie génique et cellules souches (Exemple : Dégénérescence maculaire traiter avec des cellules souches humaines pluripotentes induites)
Cours 1, question, donner la définition de Santé Canada sur le produit biologique ultérieur :
o Similarité établie avec un médicament biologique de référence o L'autorisation d'un PBU se fonde en partie sur des données d'innocuités et d'efficacité préexistantes que l'on jugerait pertinentes en raison d'un similarité établie avec un médicament biologique de référence et qui exercerait une influence sur la quantité et le genre de données originales requises
Cours 1, question: Donnez des caractéristiques d'un biologique (4 points)
o Séquence primaire d'acides aminés o Structure tertiaire-quaternaire et stabilité o Modification post-traductionnelles o Impuretés et agrégats
Cours 1, question , quelles sont les considération lors de la fabrication d'un PBU (4 points):
o Évaluation des propriétés physico-chimiques o Évaluation de l'activité fonctionnelle o Fixation au récepteur et propriété immnuochimiques o Identification des impuretés et contamination virale possible (Sensiblement la même chose)
Cours 3, Nice to know ?! Autres lignées cellulaires utilisées :
• BHK-‐21 (Rage, fièvre aphteuse...) • VERO ( maladie de carré canine, adénovirus type‐2, infectioon encéphalite équine...) • MDCK (influenza virus du porc et équin) • MDBK(diarrhée virale bovine, virus respiratoire syncytial....) • HEK-‐293 (Rage, vaccin vectorisé)
Cours 3, question quelles sont les systèmes d'expression de produits biologiques ? (6 points)
• Cellules de mammifères • E. coli, Saccharomyces cerevisiae • Cellules d'insectes • Levures ( Pichia pastoris) • Animaux transgéniques • Plantes (transgéniques)
Cours 5, questions : Nommez les critères pour évaluer un bon dosage.
• Précision : variation du dosage de fois en fois • Exactitude : véracité de l'observable • Linéarité : l'observable augmente proportionnellement à la variable • Gamme : étendue quantifiable • Limites de détection et limites de quantification: minimum et maximum de performance du dosage • Spécificité : capacité du dosage à discriminer le produit (identité) • Robustesse : reproductibilité
Cours 5, Question : On sait que c'est important de savoir si notre biologique sera à risque de causer tempete cytokinique et autre (immunogénicité) avant de démarrer l'essaie (animal ou in vitro) de facon prédictive...or on est jamais sur à 100%. Quelles sont les causes possibles d'un déclenchement du système immunitaire (qu'on veut maximiser pour les vaccins mais empêcher pour le reste)?
• Structure primaire • Modification co- et post-traductionnelles • Glycosylation • Modification provenant du procédé • Formulation • Agrégation : bien décrit dans la litérature, molecules pognés ensemble entraine inactivation mais aussi reconnaissance par non-soi
